铁蟹过敏原的分离、鉴定和快速纯化

被引:6
作者
张明琦 [1 ,2 ]
支玉香 [3 ]
吕淑霞 [1 ]
李淑荣 [2 ]
董晓颖 [1 ]
潘家荣 [2 ]
高美须 [2 ]
机构
[1] 沈阳农业大学生物科学技术学院
[2] 中国农业科学院农产品加工研究所
[3] 北京协和医院变态反应科
关键词
铁蟹肉; 过敏原; 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳; 免疫印迹; 蛋白质纯化;
D O I
暂无
中图分类号
S917.4 [水产动物学];
学科分类号
0908 ;
摘要
应用免疫印迹(Western blot)的方法鉴定铁蟹过敏原组分,然后利用电泳洗脱的方法快速纯化主要过敏原。取磷酸盐缓冲液制备的铁蟹肉浸出液,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,测定各组分的相对分子量,然后利用18例蟹过敏患者的血清进行免疫印迹,鉴定出主要和次要过敏原,利用普通垂直电泳槽快速洗脱主要过敏原蛋白,并鉴定活性。结果显示,SDS-PAGE显示铁蟹肉可辨条带有16条,相对分子质量在16.5~168kD之间。Western blotting结果表明,铁蟹肉浸出液共有10条过敏条带,其中相对分子质量为76kD的蛋白条带,阳性反应率为100%,纯化后获取了76kD的主要过敏原,经过免疫印迹鉴定其具有免疫活性。表明相对分子质量76kD的组分为铁蟹主要过敏组分,快速电洗脱可以纯化相对分子量为76kD的过敏原组分。
引用
收藏
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页数:4
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