狗牙根SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选

被引:30
作者
王志勇 [1 ]
袁学军 [2 ]
刘建秀 [2 ]
郭海林 [2 ]
机构
[1] 南京农业大学园艺学院
[2] 江苏省中国科学院植物研究所
关键词
狗牙根; SRAP标记; 正交试验; 体系优化; 引物;
D O I
暂无
中图分类号
S688.4 [草坪与地被植物];
学科分类号
090706 ;
摘要
利用正交设计,从Mg2+、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4种因素3个水平以及不同的模板DNA浓度来优化狗牙根SRAP-PCR反应体系,并对引物进行了全面筛选。狗牙根SRAP-PCR优化反应体系结果为:2μL 10×buffer4、0 ng模板DNA、Mg2+1.25 mmol/Ld、NTP 260μmol/L、引物0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0 U,总体积20μL。运用该结果从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物34对。优化体系的建立及其引物的筛选为今后利用SRAP标记技术进行狗牙根遗传分析、图谱构建、基因定位与种质资源鉴定奠定了技术基础。
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