用含底物SDS-PAGE检测明胶酶活性

被引:10
作者
孙红霞
韩梅
温进坤
机构
[1] 河北医科大学基础医学研究所生化室!石家庄
关键词
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳; 明胶酶;
D O I
暂无
中图分类号
R446.1 [生物化学检验、临床检验];
学科分类号
100208 ;
摘要
将明胶加入SDS-聚丙烯酰胺凝胶中,电泳后样品中所含明胶酶按分子量大小不同停留于凝胶中的特定位置。用TritonX-100 除去SDS 使酶复性后,明胶酶便可分解凝胶中的底物。底物被分解处考马斯亮蓝染色时不着色,因此在蓝色背景下可见酶所在位置呈白色条带,根据白色条带的深浅和宽窄可判断酶活性的高低。用此方法检查了大鼠不同组织中的明胶酶活性及传代培养对血管平滑肌细胞分泌明胶酶的影响。结果显示,大鼠不同组织及不同龄大鼠同种组织胶酶活性存在差异。另外,传代培养的平滑肌细胞与组织间分泌明胶酶的种类亦不同。
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共 2 条
[1]   甲基硝基亚硝基胍对血管平滑肌细胞增殖的影响 [J].
胡静,温进坤,魏素珍,左连富 .
中华物理医学杂志, 1994, (04) :211-213
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Electrophoretic analysis of plasminogen activation in polyacrylamide gels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates .2 HEUSSEN C,DOWDLE E B. Analytical Biochemistry . 1980