尿素溶液在测定多酚氧化酶活性上的应用

<正> 目前,测定多酚氧化酶活性最常用的方法是根据多酚氧化酶在适宜的pH值和温度条件下,催化对苯二酚,使之氧化生成有色产物,由单位时间内形成产物在460nm处的吸光值来确定酶活性的高低。为了使反应达成一致,反应进行到规定的时间后,需加入酶抑制剂来终止酶促反应。目前,常用的终止剂是1mol/L偏磷酸溶液,然而,笔者在实践中发现,当反应体系中加入1mol/L偏磷酸溶液后,虽能使酶蛋白变性失活,终止酶促反应,但同时也使酶蛋白沉淀并产生胶体颗粒,引起反应体系混浊,严重影响比色效果,导致测定结果不稳定,造成偏差。