扩展细胞色素P450 2A6对大位阻底物的适应性

被引：2

作者：

唐德芳 ^{[1
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张志刚 ^{[2
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裴小琼 ^{[2
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袁帅 ^{[1
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胡承 ^{[1
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吴中柳 ^{[2
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机构：

[1] 四川大学生命科学院生物资源与生态环境教育部重点实验室

[2] 中国科学院成都生物研究所

来源：

应用与环境生物学报 | 2009年 / 01期

基金：

中国科学院百人计划经费;

关键词：

细胞色素P4502A6; CYP2A6; 点突变; 生物转化; 6-苄氧基吲哚;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q559.9 [];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

细胞色素P450酶(P450)的分子改造及其催化的生物转化是当前的两个研究热点.本研究以扩展P4502A6的底物适应性为目标,通过尝试对P4502A6酶进行N-端修饰提高表达量、筛选随机突变库以及点突变改变活性位点重要氨基酸残基等手段,在两个随机突变体中未筛选到功能突变体,但通过点突变重要氨基酸残基获得了新的突变体P4502A6(N297Q/I300A).该突变体具有比野生型和已报道的其它突变体更广泛的底物适应性,能够催化氧化大位阻底物6-苄氧基吲哚(6-OBzl-indole)生成蓝绿色物质.该物质经质谱测定为靛蓝类二聚体化合物.实验表明,其中两个氨基酸残基的变化都是关键突变,此结果与最新的P4502A6突变体晶体结构研究相符.计算机模拟显示,I300A突变导致活性口袋在铁卟啉环的垂直和水平方向都增大,使其能接纳在两个方向都有位阻的底物;而297位的天冬酰胺是一个功能保守的残基,N297Q的变化可能与氢键等弱作用有关.

引用

页码：59 / 63

页数：5

共 7 条

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