BMP2-EGFP融合蛋白的构建及其生物活性

被引：4

作者：

张银刚

郭雄

师常宏

邹爱民

许鹏

机构：

[1] 西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室地方病研究所,西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室地方病研究所,第四军医大学基础部微生物教研室,唐都医院中心实验室,西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室地方病研究所西安,西安,西安,西安,西安

来源：

中南大学学报(医学版) | 2005年 / 01期

关键词：

BMP2; 基因转染; 真核表达; 生物活性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R341 [];

学科分类号：

摘要：

目的:构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并检测其表达的融合蛋白的生物活性。方法: 用基因重组技术构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并通过酶切和PCR鉴定。脂质体法转染COS 7细胞,用荧光显微镜检测和Westernblotting分析其在COS 7细胞表达,细胞活性实验和动物体内异位成骨实验进一步检测融合蛋白的生物活性。结果:经酶切和PCR鉴定重组质粒BMP2/pLEGFP构建成功。转染COS 7细胞后, 荧光显微镜和Westernblotting检测均显示融合蛋白在细胞中表达;分泌的产物经细胞活性实验和动物体内异位成骨实验证实具有BMP2和EGFP的双重蛋白活性。结论:基因重组技术成功构建BMP2/pLEGFP重组体,重组体表达的融合蛋白具有GFP和BMP2的双重活性。

引用

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