共 2 条
用基于TaqMan探针的Real-time PCR技术定量检测副溶血弧菌
被引：25
作者：
蔡潭溪
蒋鲁岩
黄克和
机构：
[1] 南京农业大学动物医学院
[2] 江苏省出入境检验检疫局
[3] 南京农业大学动物医学院 南京
[4] 南京
来源：
关键词：
TaqMan探针;
Real-time PCR;
副溶血弧菌gyrB基因;
定量检测;
D O I：
10.13343/j.cnki.wsxb.2005.04.034
中图分类号：
S854.43 [];
学科分类号：
0906 ;
摘要：
副溶血弧菌是一种引起食源性疾病的重要病原菌,传统的鉴定方法费时费力且容易出现假阴性,建立一种定量检测副溶血弧菌基因的方法尤为重要。根据GenBank公布的副溶血弧菌的gyrB基因序列设计一对引物和TaqMan探针,建立了基于TaqMan探针的RealtimePCR方法。通过对9种细菌(12株菌株)的DNA进行扩增,结果所有4株副溶血弧菌均可产生扩增曲线,其他8株非副溶血弧菌均不产生扩增曲线,证明了引物和探针具有很高的特异性。细菌纯培养物品和人工布菌的检测敏感度分别为1CFUPCR反应体系和10CFUPCR反应体系,相关系数均为0.99(r2=0.99),整个试验可在1h内完成。建立的方法可用于海产品中副溶血弧菌的快速定量检测。
引用
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