不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究

目的比较4种不同剂量和不同方式给予环磷酰胺诱导正常小鼠免疫抑制的4种方法,选择合适的免疫抑制动物模型以评价受试物的免疫毒性。方法选择雌性BALB/c小鼠,设1个对照组(每日灌胃蒸馏水)和4个环磷酰胺组(灌胃组每天40 mg/kg BW;腹腔注射1组每天40 mg/kg BW;腹腔注射2组,先连续注射3 d,后每周注射一次,注射剂量为80 mg/kg BW;腹腔注射3组,试验结束前24 h一次性注射200 mg/kg BW),试验周期为30 d。观察不同剂量及不同途径给予环磷酰胺后对小鼠免疫病理学、体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫等各项免疫指标的影响。结果 4个环磷酰胺组的小鼠免疫器官重量、外周血白细胞计数及其淋巴细胞百分比、血清免疫球蛋白水平、外周血B淋巴细胞百分比、脾空斑形成细胞数、24 h小鼠足跖厚度变化、脾T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力较对照组均有不同程度下降,全血中性粒细胞百分比均高于对照组。环磷酰胺灌胃组和注射1组可刺激全血NK细胞百分比较对照组明显升高,而注射2组和3组的Th细胞百分比和CD4+/CD8+值均高于对照组,其差异分别具有统计学意义(P<0.05)。此外,环磷酰胺灌胃组和注射1组还可引起动物体重下降、肝脏相对重量降低、血清谷丙转氨酶、血糖、甘油三酯的改变。对于试验所测定的大部分指标,注射2组和注射3组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论环磷酰胺的4种给予方式均可诱导动物免疫抑制,但于试验结束前24 h一次性腹腔注射200 mg/kg BW环磷酰胺为最合适的免疫抑制动物模型造模方法。