目的 :探索在短期内获得大量成活率高、分化良好的兔关节软骨细胞的方法。方法 :应用胰蛋白酶、胶原酶消化的方法从新生新西兰兔关节软骨处分离、培养软骨细胞 ,并将获得的软骨细胞在旋转生物反应器 (RCCS)内应用Cytodex 3微载体进行培养。应用倒置显微镜和扫描电镜对微载体表面的软骨细胞进行动态观察 ,并对收获的软骨细胞进行Ⅰ、Ⅱ型胶原的细胞免疫化学染色分析。结果 :关节软骨细胞可快速贴附于Cytodex 3微载体表面 ,细胞伸展后生长加速 ,到培养后期 ,细胞密度可达最初接种的 2 0倍。在微载体上收获的软骨细胞Ⅰ型胶原的免疫细胞化学染色呈阴性 ,Ⅱ型胶原染色则呈强阳性。结论 :微载体细胞培养技术是一种简便、快速的体外细胞扩增方法 ,可为构建组织工程化人工软骨提供大量软骨细胞