芒果DNA提取方法比较及ISSR反应体系的优化

被引：47

作者：

王家保

王令霞

刘志媛

杜中军

易小平

徐碧玉

机构：

[1] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

[2] 华南热带农业大学园艺学院

[3] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口

[4] 海南儋州

[5] 海南海口

来源：

生物技术 | 2005年 / 05期

关键词：

芒果; DNA提取; ISSR; 反应体系;

D O I：

10.16519/j.cnki.1004-311x.2005.05.017

中图分类号：

S667.7 [芒果];

学科分类号：

090201 ;

摘要：

为从芒果幼叶中提取高质量的核总DNA,比较了5种DNA提取方法提取芒果叶片核DNA的效果,结果表明:改良CTAB法1提取的DNA A260/A280值最好,ISSR-PCR扩增效果最佳,是有效提取芒果基因组DNA的方法。为得到最佳的芒果ISSR-PCR反应体系,以(ATG)6为引物,采用单因素实验法,优化了ISSR-PCR反应体系:在总体积25μl的反应体系中,含1×反应缓冲液,0.20mmol.L-1dNTPs,0.20μmol.L-1引物,0.60 UTaqDNA聚合酶,30-50 ng DNA模板,不足体积用无菌超纯水补足。

引用

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