去甲斑蝥素对蛋白超负荷肾病大鼠CTGF及NF-κBp65表达的影响

目的观察去甲斑蝥素对蛋白超负荷肾病大鼠结缔组织生长因子(CTGF)及核因子-κB(NF-κB)p65mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其延缓肾间质纤维化的机制。方法所有SD大鼠均行单侧肾切除术。实验组大鼠予以腹腔注射牛血清白蛋白(BSA),建立蛋白超负荷肾病模型后随机分为模型组(BSA组,腹腔注射BSA5g/(kg·d)和去甲斑蝥素组(NCTD组,腹腔注射BSA5g/(kg·d)和NCTD0.1mgg/(kg·d);对照组(Saline组,腹腔注射等量生理盐水);每组8只大鼠。第9周末处死大鼠,留取肾脏标本。行光镜和电镜观察肾组织病理改变;RT-PCR法检测CTGF和NF-κBp65mRNA表达;Westernblot及免疫组化法分别检测CTGF和NF-κBp65蛋白表达。结果①肾组织病理改变:BSA组可见肾小球球性硬化,肾小管灶性萎缩,肾间质大量炎症细胞浸润,伴灶状纤维化,病理半定量积分显示小管间质病理损伤(TIL)积分高于Saline组(P<0.01);电镜示肾小球系膜区有电子致密物沉积,足突融合。NCTD干预后,肾组织上述病理改变有所改善,且该组TIL积分较BSA组降低(P<0.05);②RT-PCR结果:NCTD组CTGF及NF-κBp65mRNA的表达较BSA组均减弱(P<0.01);③Westernblot检测结果提示NCTD组CTGF蛋白表达较BSA组下调(P<0.05);免疫组化显示,与BSA组比较,NCTD组NF-κBp65表达分布的阳性面积和阳性细胞数均明显降低(P<0.05)。结论去甲斑蝥素可通过下调蛋白超负荷肾病大鼠CTGF和NF-κBp65的表达水平,延缓肾间质纤维化。