五味子果仁醇提取物含药血清逆转肿瘤多药耐药及抑制耐药糖蛋白(P-gp)的作用

目的:利用血清药理学研究五味子醇提取物对肿瘤多药耐药的逆转作用及作用机制。方法:MTT实验测定五味子醇提取物含药血清的细胞毒作用和肿瘤多药耐药逆转活性;荧光酶标仪检测肿瘤细胞内阿霉素蓄积;流式细胞术分析P-糖蛋白(P-gp)的表达;RT-PCR法检测mdr1基因表达;高效液相色谱(HPLC)分析五味子含药血清及醇提取物指纹图谱,并分析逆转耐药有效单体五味子甲素含量。结果:五味子醇提取物含药血清在对细胞无明显毒性浓度下,能显著逆转KBv200细胞对长春新碱(vincristine,VCR)的获得耐药性,对阿霉素(doxorubicin,DOX)的交叉耐药性,以及Bel7402细胞对VCR和DOX的内在耐药性。作用机制研究结果显示,五味子醇提取物含药血清能够明显增加DOX在耐药肿瘤细胞KBv200和Bel7402细胞内的蓄积,抑制P-gp蛋白的高表达,同时降低编码P-gp蛋白的mdr1基因表达水平。HPLC图谱分析显示,含药血清及五味子醇提取物中含有有效单体五味子甲素,但含量较低,推测还可能存在其他未知逆转耐药的有效成分。结论:五味子醇提取物含药血清对肿瘤多药耐药性有显著的逆转作用,其作用机制与降低药物外排泵功能,抑制P-gp基因和蛋白过度表达,从而增加抗肿瘤药物在细胞内的蓄积有关。