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新生大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养及标记方法
被引:20
作者:
邵素霞
张雷
赵春芳
郑力芬
闫蕴力
马洪骏
机构:
[1] 河北医科大学组织学与胚胎学教研室
[2] 河北医科大学细胞研究室
[3] 河北医科大学组织学与胚胎学教研室 石家庄
[4] 石家庄
来源:
关键词:
卫星细胞;
细胞培养;
标记;
大鼠;
D O I:
暂无
中图分类号:
R329-33 [组织学技术];
学科分类号:
100101 ;
摘要:
本文用等密度沉降离心法分离出新生大鼠骨骼肌卫星细胞 ,观察其生长规律 ,检测分裂指数及生长曲线。用胶体金、DAPI及Brdu标记液分别标记细胞 8、2 4、48h ,测标记后细胞的生长曲线及标记率。结果表明分离所得肌卫星细胞纯度 95 %以上 ,梭形 ,培养第 5天细胞排列出现方向性 ,并开始融合成肌管 ,第 3~ 5天增殖旺盛 ,5代以内生长较快。三种标记方法对肌卫星细胞有不同程度毒性。胶体金标记法毒性最小 ,标记率 10 0 % ;DAPI标记细胞率为 10 0 % ;Brdu毒性最大且标记率仅为 10 %。本实验方法简单、快速 ,所得肌卫星细胞纯度高 ,性能好。胶体金标记法适合于电镜研究 ,DAPI标记法适合于光镜研究 ,Brdu标记法较差
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