猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立及其初步应用

被引：8

作者：

孙世琪

郭慧琛

尚佑军

魏旭文

靳野

马军武

韩雪清

刘湘涛

谢庆阁

机构：

[1] 中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室

[2] 中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州

[3] 甘肃兰州

来源：

中国兽医科技 | 2003年 / 09期

关键词：

猪瘟; RT-PCR ELISA; 分子诊断;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2003.09.001

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

建立了检测CSFV的快速、敏感、特异的RT PCRELISA方法。在RT PCR过程中以地高辛标记的dUTP(DIG dUTP)标记PCR产物 ,用生物素标记的捕获探针在链亲和素包被微量板孔中杂交捕获PCR产物。该方法的敏感性较常规RT PCR方法高 10 0倍 ,可检测出 35 0 μL1∶10 0 (相当于 3.5mg)的兔脾组织悬液中的C株CSFV ,特异性强 ,避免了PCR过程中因污染导致的假阳性结果。通过对RT PCR和微量杂交系统的条件优化 ,该方法用于检测C株兔脾组织毒、细胞适应毒和野毒感染的猪组织毒样品 ,效果良好

引用

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共 3 条

[1] 猪瘟病毒遗传发生关系分析 [J].

韩雪清 ;

刘湘涛 ;

赵启祖 ;

刘伯华 ;

马军武 ;

李明晖 ;

鄂承钧 ;

刘在新 ;

李健强 ;

李忠润 ;

谢庆阁 .

中国兽医科技, 1999, (06) :3-7

[2]

动物病毒学[M]. 科学出版社 , 殷震,刘景华主编, 1997

[3]

Differentiation of classical swine fever virus from ruminantpesti viruses by reverse transcription and polymerase chain reaction （RT-PCR）. Canal C W, Hotzel I, Almeida LL, et al. Veterinary Microbiology . 1996

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