人参皂苷对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸拟阿尔采末病细胞模型的影响

目的探讨人参皂苷(ginsenoside,GS)对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)诱导拟Alzheimer病(AD)细胞模型神经细胞tau蛋白的磷酸化、微管、细胞凋亡和凋亡调节因子的影响。方法GS与人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞预孵育24h,弃去培养基,然后用OA10nmol·L-1与SK-N-SH细胞共孵育6h;用倒置显微镜观察细胞形态的变化,激光共聚焦显微镜观察微管变化,Western blot方法观察磷酸化tau蛋白、凋亡因子Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达,用TUNEL法观察凋亡细胞的变化。结果正常SK-N-SH神经细胞铺展良好,OA模型组细胞突起断裂,GS显示了细胞保护作用。通过激光共聚焦显微镜观察,正常SK-N-SH细胞微管粗壮、连续,而OA模型组微管断裂、消失;GS能够减少OA引起的微管破坏作用。OA模型组tau蛋白Ser-199/202和Ser-404位点磷酸化水平较正常对照组明显增高,非磷酸化水平较正常对照组明显下降;GS 50mg·L-1和100mg·L-1组使神经细胞tau蛋白Ser-199/202和Ser-404位点磷酸化水平较OA模型组明显下降,GS 50mg·L-1和100mg·L-1组的tau蛋白Ser202非磷酸化水平较模型组则明显升高;正常对照组未见凋亡细胞;OA模型组凋亡细胞明显增多,Bax和Caspase-3表达水平较正常对照组明显增高,Bcl-2水平明显下降;GS能够明显抑制OA诱导的细胞凋亡,减少Bax和Caspase-3表达。结论人参皂苷对蛋白磷酸酶抑制剂OA所致的神经细胞病理变化有明显的保护作用,可能是通过抑制tau蛋白过度磷酸化,防止细胞凋亡来发挥作用的,提示该药在防治AD方面可能具有良好的应用前景。