埃博拉病毒检测基因芯片的制备初探

被引:4
作者
夏文英 [1 ,2 ]
郑夔 [1 ]
黄吉城 [1 ]
伊怀文 [1 ,2 ]
机构
[1] 广东出入境检验检疫局技术中心
[2] 中山大学公共卫生学院
关键词
埃博拉病毒; 基因芯片; 检测; 制备;
D O I
10.16408/j.1004-9770.2011.03.001
中图分类号
R373 [人体病毒学(致病病毒)];
学科分类号
100103 ; 100705 ;
摘要
目的制备检测埃博拉病毒(EBOV)的基因芯片,并探索利用EBOV质粒对其进行初步验证。方法设计20条特异性70mer寡核苷酸探针,点样制备成9×8的芯片阵列。采用phi 29 DNA聚合酶多重置换扩增(MDA)和荧光标记PCR技术,将标记好的样本与经过预杂交的芯片杂交、洗脱、扫描、最终进行数据分析。结果埃博拉病毒质粒与芯片上的探针杂交后,经扫描出现特异性的荧光信号,部分信号值已达到饱和,阳性对照有明显的杂交信号,而阴性对照和空白对照则呈弱或无荧光信号。芯片可检测的灵敏度达到104拷贝数。结论本实验表明该芯片具有较高的特异性、灵敏度和重复性,可为埃博拉病毒的检测提供一种有效的方法,为进一步建立埃博拉病毒的高通量筛查和鉴定技术平台提供了实验依据。
引用
收藏
页码:150 / 154
页数:5
相关论文
共 5 条
[1]  
医学RNA病毒属水平基因芯片筛查技术的研究.[D].杨银辉.中国人民解放军军事医学科学院.2009, 10
[2]   甲型流感病毒流行毒株检测和分型基因芯片的研制 [J].
李稀罕 ;
王宇 ;
刘方政 ;
顾宏伟 ;
杨永华 .
微生物学报, 2010, 50 (03) :400-405
[3]   多重置换扩增——一种新的全基因组扩增技术 [J].
刘维瑜 ;
金春莲 .
国际遗传学杂志, 2007, (04) :265-268
[4]   Isothermal strand-displacement amplification applications for high-throughput genomics [J].
Detter, JC ;
Jett, JM ;
Lucas, SM ;
Dalin, E ;
Arellano, AR ;
Wang, M ;
Nelson, JR ;
Chapman, J ;
Lou, YI ;
Rokhsar, D ;
Hawkins, TL ;
Richardson, PM .
GENOMICS, 2002, 80 (06) :691-698
[5]   Altered expression of several genes in highly metastatic subpopulations of a human pulmonary adenocarcinoma cell line [J].
Gemma, A ;
Takenaka, K ;
Hosoya, Y ;
Matuda, K ;
Seike, M ;
Kurimoto, F ;
Ono, Y ;
Uematsu, K ;
Takeda, Y ;
Hibino, S ;
Yoshimura, A ;
Shibuya, M ;
Kudoh, S .
EUROPEAN JOURNAL OF CANCER, 2001, 37 (12) :1554-1561