副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析

被引：8

作者：

苏建新

聂军

吴振龙

机构：

[1] 第一军医大学流行病学教研室,第一军医大学流行病学教研室,第一军医大学流行病学教研室广东广州,广东广州,广东广州

来源：

第一军医大学学报 | 2002年 / 06期

关键词：

弧菌,副溶血性; 耐热直接相关溶血素; 大肠杆菌; 克隆,分子; 序列分析;

D O I：

暂无

中图分类号：

R378.3 [弧菌];

学科分类号：

100103 ; 100705 ;

摘要：

目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法。方法用PCR技术扩增目的基因,双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5琢。对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp。阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600 bp的条带。DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性。结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础。

引用

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