四君子汤及单味药水溶性多糖免疫佐剂活性研究

目的探讨四君子汤及4种单味药水溶性多糖对小鼠巨噬细胞增殖、表型及吞噬功能影响。方法水提醇沉法提取四君子汤水溶性粗多糖,采用滤膜离心法将多糖按分子量(高、中、低)分为3段(分子量分别为>100 k Da、30～100 k Da和<30 k Da);相同方法制备组成四君子汤4味单药(人参、白术、茯苓和炙甘草)多糖;用不同多糖(100 mg/L)处理小鼠巨噬细胞(RAW264.7)24 h,流式细胞术分析细胞周期和活性氧(ROS)含量;检测巨噬细胞对荧光微球的吞噬能力;通过流式细胞术检测细胞膜CD40、CD86和CD284(TLR4)表达,分析不同多糖对细胞分化的影响。结果中、低分子量四君子汤多糖及单味药人参和炙甘草多糖活化巨吞噬细胞的效应较强,可促进细胞增殖,增加细胞S期和G2M期细胞百分率;四君子汤、人参和炙甘草中等分子量多糖组小鼠巨噬细胞CD40阳性细胞百分率[分别为、(86.30±3.72)%、(87.19±2.76)%、(85.48±4.63)%]明显高于对照组(76.99±3.28)%;CD86阳性细胞百分率[分别为(65.60±2.35)%、(65.72±2.35)%、(65.72±2.70)%]高于对照组(60.64±2.25)%,而CD284表达量[分别为(7.46±0.46)、(6.82±0.16)、(7.54±0.28)]高于对照组(6.24±0.74)。结论四君子汤、人参和炙甘草中等分子量多糖可上调小鼠巨噬细胞CD40、CD86和CD284表达,促进巨噬细胞极化;中、低分子量多糖具有活化巨噬细胞效应。