东方弧菌荧光酶的分离纯化和性质研究

被引:4
作者
王安平
朱文杰
郑幼霞
机构
[1] 华东师范大学生物系
[2] 华东师范大学生物系 上海
[3] 上海
[4] 上海
关键词
发光细菌; 细菌荧光素酶; 东方弧菌;
D O I
暂无
中图分类号
学科分类号
摘要
东方弧菌518菌株于20℃摆床液体培养十六小时,菌数达最大,菌体内荧光素酶含量也较高,此时收获菌体.用超声波振动破碎细胞从中提取荧光酶粗液,经DEAE-纤维索和DEAE-sephadex柱层析得到纯化的酶.用葡聚糖凝胶层析法测得该酶分子量为87000道尔顿,用SDS-PAGE法测得该酶两个亚基分子量分别为44000(α)和41000(β). 该酶在pH6.8、18℃时活性最佳,对热不稳定.以FMNH2为底物催化发光反应,最高发射波长为490nm左右.其光谱特征与文献报道的东方孤菌整体发光的光谱相一致.
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