板栗SSR和RAPD技术体系的建立

被引：8

作者：

王同坤 ^{[1
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董超华 ^{[2
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马艳 ^{[1
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齐永顺 ^{[1
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张京政 ^{[1
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柏素花 ^{[3
]}

机构：

[1] 河北科技师范学院园艺园林系

[2] 河北科技师范学院生命科学系

[3] 莱阳农学院生命科学学院

来源：

果树学报 | 2006年 / 06期

关键词：

板栗; SSR; RAPD;

D O I：

10.13925/j.cnki.gsxb.2006.06.009

中图分类号：

S664.2 [栗];

学科分类号：

摘要：

主要从板栗DNA提取、PCR条件的优化等环节对SSR和RAPD的反应条件进行了优化。结果表明,采用PVP和β-巯基乙醇联合除酚,用多次洗涤和高盐相结合进行除糖提取高质量板栗基因组DNA,所获得的DNA完整,无降解,分子量在23kb以上,可扩增、可酶切,D260nm/D230nm在2.0以上,D260nm/D280nm为1.8～2.0,产率为40～300μgDNA/g叶组织,完全满足SSR、RAPD、AFLP等分子标记技术分析的需要。采用单因素对PCR反应体系中各个影响因素进行优化,结果表明对PCR结果影响最为明显的是退火温度和Mg2+浓度的变化。对退火温度和Mg2+浓度进行优化,确定RAPD的PCR反应体系Mg2+浓度为2.0mmol/LMgCl2,退火温度38℃;SSR反应体系Mg2+浓度为2.0mmol/L,退火温度56℃。建立了一套完善的适用于板栗的SSR和RAPD分析的稳定技术体系。

引用

页码：825 / 829

页数：5

共 4 条

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