目的研究耐亚胺培南革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生及流行情况。方法采用琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对199株革兰阴性杆菌的 MIC,采用乙二胺四乙酸(EDTA)协同实验筛选金属β内酰胺酶表型。PCR 扩增耐药菌株碳青霉烯酶基因,并测序分析。脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析产酶菌株同源性。结果141株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南药敏试验结果显示具有3种模式,以亚胺培南和美罗培南同时耐药为主94株(66.7%)、亚胺培南耐药和美罗培南敏感46株(32.6%)、亚胺培南敏感和美罗培南耐药仅1株(0.7%)。但其他耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌、洛菲不动杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌和黏质沙雷菌均对亚胺培南和美罗培南同时耐药。EDTA 协同试验结果显示,仅4株耐亚胺培南铜绿假单胞菌为 EDTA 协同试验阳性(2.8%),其余菌株均为 EDTA 协同试验阴性。PCR 扩增碳青霉烯酶基因结果显示,4株 EDTA 协同试验阳性的铜绿假单胞菌产 VIM-2型金属酶;34株鲍曼不动杆菌菌株中30株(88.2%)产 OXA 型碳青霉烯酶,其中 OXA23型27株(79.4%),OXA24型13株(38.2%),OXA66型23株(67.6%)。并且22株(64.7%)细菌同时产生一种以上的 OXA 型碳青霉烯酶。7株洛菲不动杆菌全部产 OXA-23型碳青霉烯酶;11株弗劳地柠檬酸杆菌、5株肺炎克雷伯菌和1株黏质沙雷菌均产 KPC-2型碳青霉烯酶,其中6株弗劳地柠檬酸杆菌同时具有 IMP-8新亚型金属酶。PFGE 结果显示,34株鲍曼不动杆菌中 PFGE谱型共有15种,其中有14株属于 A 型,7株属于 B 型;7株洛菲不动杆菌不属于同一克隆;4株产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌不属于同-PFGE谱型;11株柠檬酸杆菌属于同-PFGE 谱型;5株肺炎克雷伯菌属于同-PFGE 谱型。结论耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药率均高于碳青霉烯类敏感革兰阴性杆菌的耐药率,而且产生多种碳青霉烯酶,并在弗劳地柠檬酸杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌中有产酶克隆株的流行。
