锦橙及山金柑胚性愈伤组织的诱导和原生质体再生植株

锦橙及山金柑胚性愈伤组织分别从花后2～8周的珠心组织和成熟种子试管实生苗诱导产生。经继代选择得到“适应”型。这种愈伤组织经0.3％的果胶酶和0.3％的纤维素酶处理16小时,分离出原生质体。原生质体培养在无激素MT培养基中,4天时出现第1次细胞分裂。6—B A 5 ppm有利于原生质体恢复分裂,但不利于以后的分化。培养15～20天时,转入摇床中培养,2个月时再生出胚状体。硫酸腺嘌呤有助于胚状体的转绿和进一步发育。成熟的子叶期胚状体转入加有赤霉素和硫酸腺嘌呤的培养基中1个月,再生出完整的植株。再生植株经锻炼后移入土壤中,成活率达90％。对再生植株及胚状体检查,没有发现有染色体数目变异。