雷帕霉素对小鼠H22肝癌细胞生长增殖的影响

目的研究雷帕霉素(rapamycin,RPM)对H22肝癌细胞生长增殖的影响。方法体外培养小鼠H22肝细胞癌株,分别与RPM、CsA、FK506和5-Fu共同孵育48 h,进行MTT实验。流式细胞仪测定各组H22细胞的细胞周期变化,ELISA法测定各组上清液中VEGF含量。体内实验建立H22肝细胞癌皮下移植瘤模型,同时完成C57BL/6→BALB/c小鼠异体皮肤移植模型。给予RPM、CsA、FK506和5-Fu灌胃,观察皮片存活情况。获取实验小鼠血清及肿瘤组织。计算各组肿瘤体积,通过CD34免疫组化染色测定各组肿瘤组织的微血管密度(MVD)。结果剂量为0.01、0.1、1 mg/L的RPM对对数生长的H22肝细胞具有细胞毒性,抑制H22小鼠肝癌细胞增殖,培养上清液中的VEGF浓度较对照组显著降低(P<0.05),细胞周期分析显示S期细胞数较其他免疫抑制剂组显著减少(P<0.05)。体内实验显示给予1.5 mg/(kg.d)和4.5 mg/(kg.d)的RPM与5 mg/(kg.d)FK5062、0 mg/(kg.d)CsA的皮片存活时间相等,而肿瘤体积显著减小(P<0.05)。与对照组相比,实验剂量RPM显著降低了荷瘤小鼠血清中的VEGF含量(P<0.05),同时瘤组织内的MVD显著减少(P<0.05)。结论体外实验研究和动物实验证实,RPM具有抗免疫排斥和抗肿瘤增殖的特点,可能在肝移植治疗肝脏恶性肿瘤方面发挥优势。