槐耳清膏诱导人直肠癌HR8348细胞凋亡的实验研究

[目的]探讨槐耳清膏在体外对人直肠癌HR8348细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用及其作用机制。[方法]将处于对数生长期的HR8348细胞用含槐耳清膏的培养基培养36小时,用MTT比色法检测OD值,计算抑制率;用甲基绿-派诺宁染色法及TUNEL法检测细胞凋亡指数;用免疫组织化学方法研究Bcl鄄2、Bcl鄄XL、Bax、Bak及p53基因表达情况。[结果]①槐耳清膏对HR8348细胞的抑制率随浓度增加而上升,浓度4.0mg/ml的抑制率最大,为71.1%。与5鄄Fu10μg/ml对照组相比无显著差异(P>0.05)。②两种凋亡检测方法均可见到典型的细胞凋亡、凋亡小体或出泡现象。凋亡指数随槐耳清膏浓度增加而增加,当浓度达4.0mg/ml时,凋亡指数迅速上升,甲基绿-派诺宁法达0.1620,TUNEL法达0.2612,均大于5鄄Fu10μg/ml对照组的凋亡指数,差异显著(P<0.05)。③槐耳清膏组Bcl鄄2、Bcl鄄XL、Bak、p53蛋白表达较空白对照组明显增强(P<0.05),而Bax变化不明显(P>0.05)。槐耳清膏组Bak/Bcl鄄2和Bak/Bcl鄄XL比值显著大于空白对照组。[结论]①槐耳清膏在体外对人直肠癌HR8348细胞具有显著的抑制作用和凋亡诱导作用。②槐耳清膏诱导人直肠癌HR8348细胞凋亡可能与提高Bak/Bcl鄄2、Bak/Bcl鄄XL比值及上调p53基因表达有关。