益生菌对炎性肠病小鼠肠屏障功能的影响

被引:23
作者
陈红旗 [1 ]
杨俊 [1 ]
周玉坤 [1 ]
张旻 [2 ]
杭晓敏 [2 ]
秦环龙 [1 ]
机构
[1] 上海交通大学附属第六人民医院普外科
[2] 上海交大昂立医药研究院
关键词
益生菌; 植物乳杆菌; 肠屏障; 紧密连接蛋白;
D O I
暂无
中图分类号
R574.62 [结肠疾病];
学科分类号
100201 [内科学];
摘要
目的研究益生菌植物乳杆菌(LP)对炎症状态下肠屏障的修复机理。方法以白介素-10基因敲除(IL-10-/-)小鼠为炎性肠病模型,采用简单随机法(随机表)将空白对照(WT)小鼠和IL-10-/-小鼠分成4组:WT组、WT+LP组、IL-10-/-组和IL-10-/-+LP组,每组10只。分别灌饲Ringer液或LP溶液,持续4周。每周记录小鼠肠炎的临床表现,实验结束后收集小鼠结肠组织,进行病理评分和形态观察,ELISA法检测结肠组织促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)浓度,利用Ussing Chamber技术对小鼠结肠通透性及电生理变化进行分析,并用Western blot和免疫荧光分析法对结肠上皮细胞紧密连接蛋白进行定量和定位研究。结果与WT组相比,IL-10-/-组小鼠腹泻、直肠脱垂和体重丧失较明显(P<0.01);TNF-α和IFN-γ浓度明显升高(P<0.01);病理表现为大量炎性细胞浸润,偶见透壁性溃疡和隐窝脓肿形成;超微电镜提示紧密连接结构破坏;紧密连接蛋白(ZO-1、occludin、claudin-1)表达明显降低(P<0.01)且伴有异常分布;结肠上皮细胞甘露醇通透性升高(P<0.001),跨膜电阻值降低(P<0.001)。LP干预4周后,与IL-10-/-组相比,LP能显著改善肠道炎症的临床和病理表现,阻止紧密连接超微结构破坏,促进紧密连接蛋白的表达(P<0.01),降低结肠上皮细胞甘露醇通透性(P<0.001),升高跨膜电阻值(P<0.001),降低了TNF-α和IFN-γ的浓度(P<0.01),减轻了肠道炎症。结论 LP能通过促进肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达修复受损肠屏障功能,从而减轻肠道炎症。
引用
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