沙田柚花柱S-糖蛋白的纯化和N-端序列测定

被引:14
作者
杨继华
饶桂荣
薛妙男
机构
[1] 广西师范大学生物学系!广西桂林
关键词
沙田柚; 花柱S-糖蛋白; 亲和层析; N-端氨基酸序列;
D O I
10.16088/j.issn.1001-6600.2001.01.016
中图分类号
Q946.1 [蛋白质];
学科分类号
071001 ;
摘要
以人工自花授粉 3 d后的沙田柚 (Citrusgrandisvar.Shatinyu Hort.)花柱为材料 ,切取 1 /2部位处花柱组织 ,匀浆后 ,进行抽提和硫酸铵盐析 ,得到 3 5%级分的蛋白质粗提液 ,此液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,显示出 9条蛋白质带 ;经 Con A-Sepharose 4 B亲和柱层析 ,特异峰 (S#)仅显示 1条蛋白质带 ,恰好是 3 5%级分中近正极端的 2种蛋白质中的一种最优势蛋白质 ;部分生化性质测定结果表明 ,该蛋白质为碱性糖蛋白 ,糖含量为 9.2 % ,由 2个亚基组成 ,相对分子质量分别为 3 8.0 ku,3 2 .0 ku,等电点分别约为 7.5,7.2 ;生物活性测定结果表明 ,该蛋白质能抑制离体 (in vitro)萌发自花花粉花粉管的生长 ;氨基酸序列分析表明 ,3 2 .0 ku组分 N-端 1 5个氨基酸序列与矮牵牛 ,花烟草等的 N-端相应序列极相似
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