葡萄果肉亚细胞组分的分离和质膜的纯化

利用差速离心法从葡萄果肉组织中分离了微粒体和胞质组分，将微粒体进一步利用两相分配法进行了质膜和细胞内膜的分离。结果表明，微粒体分离是整个实验技术的难点；研磨缓冲液成分是影响微粒体分离和微粒体在两相体系中分配（质膜纯化）的关键因素；排除果肉组织中有机酸、酚类和果胶物质的干扰是确定研磨缓冲液的原则；从设计的８种研磨缓冲液中选出了最佳配方。用最佳研磨缓冲液制备出高得率和高质量的微粒体。两相分配后的标志酶活性检测表明，上相富含质膜，内膜污染较少，质膜纯度较高；而下相富含内膜。证明了ＰＥＧ－Ｄｅｘｔｒａｎ两相分配法对于葡萄果肉组织质膜的纯化也是适用的。