大鼠脑红蛋白(NGB)的原核表达、抗体制备及其细胞分布

被引：15

作者：

张成岗

李林

邓美玉

王春丽

谢芳

周婉琼

王航雁

贺福初

机构：

[1] 军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,中国人民解放军总医院小儿内科,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,中国人民解放军总医院小儿内科,军事医学科学院放射医学研究所北京,北京

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2002年 / 01期

关键词：

大鼠; 脑红蛋白; 原核表达; 抗体制备; 真核表达; 免疫组化;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2002.01.021

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

脑红蛋白 (NGB)是新发现的与脑内氧供应密切相关的分子 .为了检测细胞内脑红蛋白的表达、亚细胞分布从而对该分子进行深入的功能研究 ,成功地将大鼠脑红蛋白基因编码区构建于原核表达载体pGEX 4T 2 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得融合表达产物 .对含有融合蛋白的包含体进行溶解和复性 ,用谷胱甘肽S 转移酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,通过免疫家兔获得了兔源性抗NGB多克隆抗体 .采用Western印迹分析技术 ,用该抗体检测NGB基因的真核表达产物 ,证明该抗体有较好的针对NGB蛋白的专一性 ,可用于对NGB的结构和功能研究 .同时 ,用该抗体进行免疫组化分析发现 ,正常成年大鼠神经系统中有较多的NGB免疫反应阳性细胞分布 ,提示NGB是与神经系统功能密切相关的重要分子

引用

页码：80 / 84

页数：5

共 10 条

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