空肠弯曲菌免疫磁珠富集方法的建立

被引:3
作者
王壮 [1 ]
欧瑜 [1 ]
唐泰山 [2 ]
祝长青 [2 ]
栾军 [2 ]
蒋原 [2 ]
张常印 [2 ]
机构
[1] 中国药科大学生命科学与技术学院
[2] 江苏出入境检验检疫局动物检疫实验室
关键词
空肠弯曲菌; 特异性抗体; 免疫磁珠; 富集; 添加; 干扰菌;
D O I
10.19526/j.cnki.1005-8915.2014.01.009
中图分类号
R915 [药物生物学];
学科分类号
1007 ;
摘要
为建立空肠弯曲菌富集方法,研究利用空肠弯曲菌特异性多表位人工多肽的特异性抗体包被磁珠,制成免疫磁珠富集空肠弯曲菌。在不同稀释梯度的菌液中加入免疫磁珠,富集目标菌,铺于CFA显色平板培养,统计菌落个数,确定免疫磁珠的敏感性;在非空肠弯曲菌和弯曲菌中分别添加空肠弯曲菌,用免疫磁珠富集,确定免疫磁珠的特异性。结果表明2 mg免疫磁珠可以在1 mL空肠弯曲菌菌液(浓度为2.5×103/mL)中稳定富集到空肠弯曲菌,统计菌落数为100~300 CFU,具有较好的敏感性;在干扰菌中富集空肠弯曲菌,铺板培养后,荧光PCR鉴定为阳性,富集不受干扰菌影响。用建立的免疫磁珠富集方法富集采集样品中的空肠弯曲菌,结果显示该方法有较好的特异性,具有较好的应用前景。
引用
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