烟草生活胚囊及胚囊原生质体的分离

从固定的和新鲜的材料分离完整的胚囊已有过报道。然而本研究从新鲜胚珠中分离出胚囊细胞的原生质体,包括卵、助细胞、中央细胞和反足细胞的原生质体,则是第一次成功。虽然这还只是一个初步的工作,但表明被子植物裸露的雌配子原生质体能被分离,在遗传操作和植物细胞生物工程中的应用上,显示出是有潜力的。用烟草不同发育时期的新鲜胚珠为材料,用酶解压片法能分离完整的胚囊以及胚囊细胞的原生质体。胚珠酶解处理3—3.5小时,可分离出整体胚囊。所获得的二核、四核和成熟时期的胚囊看起来是饱满的和有生活力的,在结构上也是十分清楚的。当酶解的时间延长到4-8小时,胚囊周界壁被部分地消化,胚囊细胞的原生质体从珠孔端或合点端逸出。各种胚囊的细胞的原生质体能从它们的大小和其它特征加以识别。分离的完整的胚囊和胚囊细胞的原生质体用荧光素双醋酸脂方法鉴定活性,证明是有生活力的。对分离的胚囊细胞的原生质体在遗传操作方面的重要性进行了讨论。