人朊蛋白基因外显子Ⅰ及其上游序列具有启动子样活性

被引:2
作者
孙宪锋
董小平
周伟
洪涛
机构
[1] 北京中国预防医学科学院病毒学研究所病毒形态研究室,北京中国预防医学科学院病毒学研究所病毒形态研究室,北京中国预防医学科学院病毒学研究所病毒形态研究室,北京中国预防医学科学院病毒学研究所病毒形态研究室
关键词
朊蛋白基因; 启动区(遗传学); 转录,遗传; 转染;
D O I
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中图分类号
学科分类号
摘要
目的 鉴定朊蛋白 (PrP)基因转录启动子位置。方法 利用聚合酶链反应 (PCR)扩增人PrP基因外显子Ⅰ及其上游序列 ,序列鉴定后插入CAT报道质粒pBL CAT6 ,分别转染HeLa、COS7和Sh sy5y细胞系 ,检测CAT表达值 ;提取三种细胞蛋白 ,以条带移动实验检测细胞转录激活因子SP1含量。结果 人PrP基因外显子Ⅰ及其上游序列为GC富含 ,带有多个SP1可能性结合位点 ,但无明显TATA盒 ;瞬时转染结果显示这段序列可诱导 2~ 3倍的CAT表达增强 ;定量移动条带实验证明HeLa细胞中含有较高浓度的SP1,而COS7和Sh sy5 y细胞中SP1含量极低。结论 人PrP基因外显子Ⅰ及其上游序列具有启动子样功能 ,为弱的非TATA盒启动子 ;不同组织来源的细胞中SP1含量不同 ,在神经细胞系Sh sy5y中人PrP基因外显子Ⅰ及其上游序列的启动子活性似乎不依赖于SP1蛋白
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