生物素标记LT基因探针检测产肠毒素性大肠杆菌附视频

被引：1

作者：

富常勤

周志江

郑明光

机构：

[1] 兽医大学公共卫生系

来源：

兽医大学学报 | 1992年 / 03期

关键词：

生物素标记; LT基因探针; 菌落杂交; 点杂交; 产肠毒素性大肠杆菌; 食品;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.1992.03.002

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

用碱变性法提取重组质粒pEWD299,经Hind Ⅲ酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳,用电洗脱法回收LT基因850bp的核酸片段,再用二步法缺口翻译反应制备生物素标记的LT基因探针.通过菌落杂交试验表明,在严格去蛋白和RNA的条件下,该探针与试验中所有产LT和ST,或仅产LT的ETEC发生杂交反应;而与所有仅产ST的ETEC、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、普通大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、小肠结肠耶尔森氏菌、霍乱弧菌均无杂交反应.其检测提纯的LT—DNA的敏感性水平为25pg,检测食品模拟标本中产LT大肠杆菌的敏感性达到130个细菌/g的水平.

引用

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