人血小板TGF β的提取纯化及鉴定

目的：建立一种快速、简单、实用的从人血小板提纯转化生长因子β（ＴＧＦβ）的方法。方法：改良的白膜回浆法提取人血小板，酸醇抽提裂解法提取血小板中的ＴＧＦβ及２ 次凝胶过柱法纯化ＴＧＦβ。所有提取及纯化步骤均在酸性条件下进行以防止管壁对ＴＧＦβ的吸附和生物活性的影响；使用了易挥发的溶媒和缓冲液便于冻干时去除。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳及薄层分析显示纯化后的ＴＧＦβ纯度达到８９．３８％ ，在ＥＧＦ参与下１０ｎｇ／ｍ ｌ浓度的ＴＧＦβ可刺激ＮＲＫ细胞在软琼脂培养中呈多克隆样生长。结论：运用本方法提取的ＴＧＦβ纯度高，生物活性强；与以前方法相比具有成本低廉、提取工艺简单、快速实用的特点。