大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ基因的克隆及表达

被引：17

作者：

梁东春

郭刚

左爱军

张镜宇

机构：

[1] 天津医科大学内分泌研究所,天津医科大学内分泌研究所,天津医科大学内分泌研究所,天津医科大学内分泌研究所天津,天津,天津,天津

来源：

遗传学报 | 2002年 / 12期

关键词：

外显子拼接; 大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ; 基因克隆; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

071010 [生物化学与分子生物学];

摘要：

以大鼠染色体DNA为模板 ,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因外显子 2编码区和外显子 3编码区 ,并使外显子 2编码区的 3′端与外显子 3编码区的 5′端有相同的 4 0个碱基。采用外显子拼接法 ,以两种扩增产物为模板再次进行PCR ,得到 2 10bp的大鼠IGF Ⅰ基因全编码序列。将此序列克隆入pUC18质粒进一步构建表达型重组质粒pGEX IGF Ⅰ ,并在大肠杆菌DH5α中进行诱导表达。表达产物经SDS PAGE分析及Westernblot检测 ,并经体外实验证明其具有刺激细胞增殖的生物活性。

引用

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