脱落酸的酶标免疫测定

被引:3
作者
季本仁
段金玉
机构
[1] 中国科学院昆明植物研究所,中国科学院昆明植物研究所
关键词
脱落酸; 酶标免疫测定; 辣根过氧化物酶;
D O I
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中图分类号
学科分类号
摘要
使用国产辣根过氧化物酶(HRP)合成酶标记物,用竞争法进行了植物内源激素脱落酸(ABA)的酶标免疫测定研究。测定范围为0.0125ng—100ng,在此范围内logitB/B。与ABA浓度的对数之间呈较好的线性关系。检测的灵敏度达到5×10-14克分子。比较了两种酶标记方法对于测定的影响,结果发现直接使ABA共价结合到HRP上形成ABA-HRP酶标记物比先将ABA与牛血清白蛋白(BSA)结合后,然后进一步再与HRP反应形成ABA—BSA—HRP复合物灵敏度高,非特异性吸附小,而且合成步骤较少。酶标记物的稀释度直接影响测定的灵敏度和浓度对数与logit B/B。之间的线性关系好坏;在以每毫升3—6微克免疫球蛋白包埋免疫吸附板进行测定时,用每毫升5微克酶标记物的浓度获得了最佳结果。
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