缺氧诱导心肌细胞凋亡与Caspase-3激活及细胞内钙超载的关系

被引：14

作者：

周舟

王小华

朱光旭

余争平

机构：

[1] 第三军医大学劳动卫生学教研室,第三军医大学劳动卫生学教研室,第三军医大学劳动卫生学教研室,第三军医大学劳动卫生学教研室重庆,重庆,重庆,重庆

来源：

中国应用生理学杂志 | 2005年 / 01期

关键词：

缺氧; 凋亡; Caspase-3; 细胞内钙; 心肌细胞;

D O I：

10.13459/j.cnki.cjap.2005.01.004

中图分类号：

R363 [病理生理学];

学科分类号：

100104 ;

摘要：

目的 :研究缺氧对心肌细胞Caspases的激活效应与细胞内钙的关系。方法 :将培养的心肌细胞暴露于 95 %N2 / 5 %CO2 混合气体培养室进行缺氧处理 ,缺氧 0、30min、1、3、6、12、2 4h后 ,应用激光共聚焦显微镜检测缺氧早期心肌细胞胞浆游离钙的变化 ;应用细胞内钙螯合剂、Caspase 1与Caspase 3特异性抑制剂预处理心肌细胞后缺氧12h ,检测DNA片段化与Caspase 3活性 ;Westernblot、RT PCR方法分别检测细胞线粒体与胞浆中Cytc蛋白的变化以及Caspase 3mRNA表达的改变。结果 :缺氧后 30min心肌细胞胞浆游离钙即显著增高 ,1h达到峰值。缺氧3h线粒体Cytc无显著变化 ,而胞浆中Cytc开始增多 ,至缺氧 12h ,线粒体中Cytc仅见一弱阳性条带 ,而胞浆呈强阳性反应 ,缺氧 2 4h线粒体中已不能检测到Cytc。缺氧 3h心肌细胞Caspase 3mRNA上调 ,在观察的 2 4h内持续处于高表达状态。分别应用Caspase 3抑制剂和细胞内钙螯合剂预处理心肌细胞后均可使心肌细胞Caspase 3活性降低并完全阻断DNA片段化发生 ,细胞内钙螯合剂与Caspase 3抑制剂联合应用使凋亡细胞百分率降低的程度比分别单独使用两者更明显。结论 :缺氧可致心肌细胞线粒体Cytc释放至胞浆 ,导致Caspase途径激活 ,从而导致细胞凋亡。缺氧所致心肌细胞钙超载在时序上早于

引用

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页数：6

共 8 条

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