用地高辛标记的PCR-ELISA技术快速检测转基因鱼

被引:11
作者
陈茹
林志雄
刘琳琳
朱道中
罗长保
颜思通
机构
[1] 广州出入境检验检疫局动物检疫实验室
关键词
Dig-PCR-ELISA; 小鼠重金属螯合蛋白基因启动子; 人生长激素基因; 转基因鱼; 快速检测;
D O I
暂无
中图分类号
S961.6 [生物技术];
学科分类号
摘要
取含有小鼠重金属螯合蛋白 (mMT)基因启动子及人生长激素 (hGH)基因的鱼样品 ,以Qiagene核酸纯化技术对鱼组织DNA进行纯化。常规PCR检测显示 ,mMT启动基因和hGH基因的PCR产物分别为2 4 0bp和 130bp ,与设计相符。PCR产物的核酸测序结果证实其扩增产物具特异性。地高辛 PCR(Dig PCR)标记反应显示 ,2个基因均产生 1条Dig标记的特异产物带。Dig PCR ELISA检测敏感性试验显示 ,对mMT启动子和hGH基因的检测敏感性可达 10 - 3,与常规PCR结合琼脂糖凝胶电泳检测方法相比 ,检测敏感性可提高至 10 0~ 10 0 0倍。试验证明 ,针对mMT和hGH基因所建立的Dig PCR ELISA技术特异可靠
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