牛血清白蛋白脂质体包封率的测定方法研究

在较温和的实验条件下,制备粒径约100 nm包载模型药牛血清白蛋白(BSA)脂质体,将双波长考马斯亮蓝G-250染料结合法用于测定BSA脂质体包封率时游离蛋白质含量。BSA包封率测定运用凝胶柱色谱法,考察不同型号的葡聚糖凝胶对游离药物和脂质体的分离性能;对于游离BSA的测定,比较了双波长紫外分光光度法、考马斯亮蓝G-250染料法(Bradford法)、双波长考马斯亮蓝G-250染料法3种测定方法。在吸收度和线性均良好的情况下,双波长考马斯亮蓝G-250染料法的检测范围为0.25～32μg.mL-1,与Bradford法的检测范围(5～80μg.mL-1)相比,检测灵敏度提高了20倍,检测范围更宽。由此可见,双波长考马斯亮蓝G-250染料法测定蛋白质含量时,检测限较低,线性良好,检测线性范围更宽,可作为测定BSA脂质体包封率时蛋白质含量的测定手段。