槐杞黄干预小鼠IgA肾病模型的疗效观察以及机制探讨

目的:探讨槐耳菌质、枸杞子和黄精组方(简称槐杞黄)对免疫性肾病的疗效及其机制。方法:雌性BABL/c小鼠随机分为3组,即正常对照组、IgA肾病模型组、槐杞黄治疗组,每组10只。IgA肾病组和槐杞黄治疗组用牛血清白蛋白酸化水灌胃、牛血清白蛋白以及葡萄球菌肠毒素尾静脉注射免疫建立IgA肾病模型,正常对照组以酸化水灌胃,磷酸盐缓冲溶液尾静脉注射作为对照。槐杞黄治疗组于免疫8周后按4g/kg体重给予槐杞黄浸膏干预,正常对照组、IgA肾病模型组以等量的生理盐水作为对照。观察3组小鼠血清白蛋白、尿素、肌酐24h尿蛋白变化以及肾脏病理改变。12周后处死小鼠,无菌分离脾淋巴细胞,并将各组细胞悬液接种于24孔板中置于37℃、50ml/LCO2条件下孵育51h。用ELISA方法检测各组培养细胞上清中细胞因子IL-2、IL-4、INF-γ的水平,比较各组小鼠INF-γ/IL-4的比值。留取血清,用ELISA方法定量检测血清总IgA的浓度,比较各组动物血清IgA水平。结果:1)第八周和第十二周模型组24h尿蛋白均较对照组明显增加(P<0.05),治疗前(8周)槐杞黄治疗组和模型组24h尿蛋白差异无统计学意义(P>0.05),治疗4周后,槐杞黄治疗组24h尿蛋白较模型组明显降低(P<0.05);2)实验结束时模型组血清白蛋白较对照组明显下降(P<0.05),槐杞黄治疗组血清白蛋白较模型组明显升高(P<0.05);尿素氮、肌酐含量三组之间差异无统计学意义;3)病理检查显示对照组无明显异常,模型组出现较显著的肾小球系膜细胞增生和系膜基质增多,毛细血管袢受压,开放欠佳,且免疫荧光显示肾小球系膜区和毛细血管壁有较强的颗粒状或者团块状IgA沉积;槐杞黄治疗组肾小球系膜细胞增生和系膜基质增多情况和IgA沉积程度较模型组明显减轻,毛细血管袢开放良好;4)模型组IL-2、INF-γ的分泌较对照组下降(P<0.01)、IL-4分泌较对照组升高(P<0.01);槐杞黄治疗后的IL-2、INF-γ的分泌较模型组升高(P<0.01),IL-4分泌较模型组下降;5)模型组INF-γ/IL-4的比值较对照组下降(P<0.05),槐杞黄治疗组INF-γ/IL-4的比值较模型组升高(P<0.01),血清总IgA的浓度模型组较对照组升高(P<0.01),槐杞黄治疗组较模型组降低(P<0.05)。结论:槐杞黄治疗可以显著减少小鼠IgA肾病尿蛋白,减轻肾小球系膜增生。其机制可能与其上调IL-2、INF-γ表达以及下调IL-4表达,纠正Thl/Th2失衡的作用密切相关。