二氧化硅致人单核细胞THP-1核因子-κB活化定位改变的研究

目的　探讨矽肺发病过程中SiO2 诱导对人单核细胞株THP 1核因子 κB(NF κB)活化的影响。方法　采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜 (LSCM ,Zeiss 5 10 )检测THP 1细胞NF κBp6 5亚基 (NF κB/p6 5 )定位 ;Western blot法测定THP 1细胞核蛋白中NF κB/p6 5水平。结果　免疫荧光分析显示 ,异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的NF κB/p6 5在胞浆区为绿色荧光 ,而进入了丙亚基碘(PI)红色荧光标记的胞核区时则红绿两色叠加成黄色荧光。正常细胞NF κB/p6 5主要分布于胞浆区 ,核区很少 ,而 10 0 μg/mlSiO2 刺激 30min后NF κB/p6 5荧光标记集聚于核区 ,胞浆区少见。Western blot结果显示 ,对照组 (0 μg/mlSiO2 )THP 1细胞核蛋白中有低水平NF κB/p6 5表达 ;10 0 μg/ml和 2 0 0μg/mlSiO2 作用 15min和 30min ,THP 1细胞核蛋白中NF κB/p6 5表达增加 ,并随着剂量的增加和时间的延长 ,NF κB/p6 5水平相对增加。NF κB/p6 5激活剂脂多糖 (LPS)处理的THP 1细胞NF κB/p6 5定位情况和核蛋白水平与上述结果相似。结论　SiO2 刺激可引起THP 1单核细胞NF κB核转位活化。