目的:建立同时测定白花蛇舌草中2-甲基-3-羟基-4-甲氧基蒽醌(Ⅰ)和2-甲基-3-羟基蒽醌(Ⅱ)含量的高效液相色谱方法。方法:采用 Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(62:38,v/v)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长267 nm,柱温为室温。结果:Ⅰ和Ⅱ浓度分别在0.1~5.0μg·mL-1(r=0.9999)和0.2~10.0μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性关系良好;加样回收率(n=6)分别为99.2%(RSD=1.9%)和99.8%(RSD=2.3%)。结论:本法准确可靠,重复性好,适用于白花蛇舌草中Ⅰ和Ⅱ的含量分析。