RT-PCR检测菊花B病毒的研究

被引：25

作者：

吴红芝

孔宝华

陈海如

刘海燕

机构：

[1] 云南农业大学云南省植物病理重点实验室,云南农业大学云南省植物病理重点实验室,云南农业大学云南省植物病理重点实验室,云南农业大学云南省植物病理重点实验室云南昆明云南农业大学园林园艺学院园林系,云南昆明,云南昆明,云南昆明,云南昆明

来源：

西南农业大学学报 | 2002年 / 02期

关键词：

菊花; 菊花B病毒; RT-PCCR; 检测;

D O I：

10.13718/j.cnki.xdzk.2002.02.006

中图分类号：

S432.41 [];

学科分类号：

摘要：

根据菊花B病毒 (CVB)的外壳蛋白基因序列设计、合成引物 ,以感病组织和健康组织总RNA为模板 ,进行cDNA合成和PCR扩增 ,结果从感病组织中扩增出与预期的 776bp大小一致的目标片段 ,而健康组织无此扩增产物 ;将PCR产物插入pGEM -T载体克隆并测序 ,序列分析表明与CVB的相应序列同源性达到 85 % ;将感病组织总RNA以 10x梯度稀释成不同浓度 ,测出RT -PCR检测CVB的灵敏度为 10 -4x ;PCR产物克隆作为RT -PCR反应的阳性对照 ,解决了毒源保存和传播的问题 ,从而建立了CVB快速、灵敏、准确的RT -PCR鉴定和检测技术

引用

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