非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达

被引：7

作者：

侯艳梅 ^{[1
]}

董志珍 ^{[1
]}

赵祥平 ^{[1
]}

李琳 ^{[2
]}

肖妍 ^{[1
]}

陈本龙 ^{[1
]}

蔡国瑞 ^{[1
]}

栾慎顺 ^{[1
]}

王建华 ^{[1
]}

机构：

[1] 天津出入境检验检疫局

[2] 天津大学农业与生物工程学院

来源：

中国兽医科学 | 2009年 / 39卷 / 04期

关键词：

非洲猪瘟病毒; P54基因; 原核表达;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2009.04.005

中图分类号：

S852.659.1 [];

学科分类号：

摘要：

根据GenBank中非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法从ASFV DNA中分别扩增出了P54基因片段和经过改造的跨膜信号肽缺失的P54基因,将其克隆到表达载体pET28b中,构建了重组质粒pET-P54和pET-P54q,测序验证后转化入表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE,Western-blotting检测。结果显示,经过改造的信号肽缺失的重组菌pET-P54q可表达出分子质量约24.5 ku的重组融合蛋白,表达的蛋白以可溶形式存在于菌体中,经镍柱亲和层析纯化可获得纯度较高的目的蛋白。纯化的蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,证实,表达的蛋白具有较好的反应原性。

引用

页码：316 / 320

页数：5

共 5 条

[1] 非洲猪瘟的研究进展
常华
花群义
段纲
项勋
曾昭文
[J]. 中国畜牧兽医, 2007, (01) : 116 - 118
[2] 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达、纯化与结构分析
黄金海
杨汉春
郭鑫
陈艳红
查振林
[J]. 微生物学报, 2004, (06) : 737 - 740
[3] 不同非洲猪瘟病毒株j5R基因及其编码蛋白的比较
孙怀昌
ＬｉｎｄａＫＤｉｘｏｎ
ＲＭＥＰａｒｋｈｏｕｓｅ
[J]. 中国预防兽医学报, 1999, (02) : 38 - 40
[4] 非洲猪瘟研究进展
曲连东
于康震
[J]. 中国兽医科技, 1998, (11) : 42 - 43
[5] 动物病毒学[M]. 科学出版社 , 殷震,刘景华主编, 1997

← 1 →