梨火疫病菌的实时荧光PCR检测

被引：18

作者：

钱国良

胡白石

卢玲

刘凤权

许志刚

机构：

[1] 南京农业大学植物保护学院农业部病虫检测与治理重点实验室

来源：

植物病理学报 | 2006年 / 02期

关键词：

梨火疫病菌; SYBRGreenI; 实时荧光PCR; 检测;

D O I：

10.13926/j.cnki.apps.2006.02.005

中图分类号：

S436.612 [梨病虫害];

学科分类号：

090401 ; 090402 ;

摘要：

根据梨火疫病菌16S23S间的ITS保守序列,设计并合成了一对特异性引物REA/FEA,应用荧光染料SYBRG reen I,对10个梨火疫的菌株和其它相关参试菌株进行了检测。结果表明,10个梨火疫菌株都产生荧光信号而其它参试菌株都不产生荧光信号,成功建立了梨火疫病菌的实时荧光PCR检测方法。整个检测过程只需3 h,完全闭管,降低了污染的机会,无需PCR后处理。检测的灵敏度是4个菌体细胞,比常规PCR电泳检测提高了10倍。用该特异性引物对梨枝条浸泡液进行实时荧光PCR检测,结果可特异性检测到目标菌的存在,并且检测的灵敏度是24个菌体细胞,比常规PCR电泳检测提高10倍。

引用

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