长臂光敏基因探针对结核性浆膜腔积液的诊断价值

被引:13
作者
王卫华
肖红
肖勇
符志军
机构
[1] 武汉市结核病防治所
[2] 武汉市东湖医院
关键词
分枝杆菌,结核; 克隆; 生物素; 探针;
D O I
暂无
中图分类号
R521.7 [胸膜炎];
学科分类号
100201 [内科学];
摘要
目的 研究聚合酶链反应 (PCR)联合长臂光敏生物基因探针对浆膜腔积液性质的诊断价值。方法 通过PCR特异扩增人型结核分枝杆菌 (H37Rv)IS986基因序列 2 45bp片段 ,构建含该特异片段的重组质粒 ,以该重组质粒DNA为模板 ,用PCR扩增IS986产物制备长臂光敏生物素标记的基因探针 ,进行探针特异性检测。同时对 6 5份胸腔积液标本进行基因扩增联合探针检测并与传统的病原学检测方法进行比较。结果 通过PCR联合探针检测结果显示 :该探针除了与人型、牛型、田鼠及非洲分枝杆菌有特异杂交信号外 ,与其他的分枝杆菌没有杂交反应。故此探针具有良好的特异性。对 6 5份临床胸腔积液标本进行结核分枝杆菌检测 ,其阳性检出率 (4 6 .6 6 % )分别高于PCR(2 6 6 6 % )、涂片 (0 % )及培养 (13.33% )的检出率。结论 该基因探针特异性强、敏感性高 ,与目前涂片镜检、培养法、单纯PCR扩增相比均有明显优势 ,适用于临床检测 ,有推广价值。
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