康乃馨ACC氧化酶cDNA的克隆及其反义植物表达载体的构建

被引：2

作者：

张树珍

汤火龙

杨本鹏

刘飞虎

机构：

[1] 云南大学生命科学与化学学院,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,云南大学生命科学与化学学院云南昆明,中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,海南海口,海南海口,云南昆明

来源：

云南植物研究 | 2002年 / 06期

关键词：

康乃馨; ACC氧化酶; RT-PCR; 反义植物表达载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943 [植物细胞遗传学];

学科分类号：

071007 ; 090102 ;

摘要：

以康乃馨 (DianthuscaryophyllusL .)花瓣为材料 ,用改进的异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,根据已报道的康乃馨ACC氧化酶 (1 aminocyclopropane 1 carboxylicacidoxidase ,ACO)基因的序列设计并合成一对引物 ,通过RT PCR方法获得一约 1 2kb特异片段 ,把该片段连接到pGEM(R) Teasyvector上进行测序 ,其全长共 115 6bp ,编码区 915bp ,共编码 30 4个氨基酸残基。序列分析结果表明该序列与GenBankL35 15 2中的康乃馨ACC氧化酶基因的cDNA序列完全相符 ,推断该基因在康乃馨种内可能是完全或高度保守的。随后将此片段反向插入植物表达载体pBI12 1的 35S启动子和NOS终止子之间 ,构建了一反义植物表达载体pBO ;又把花特异表达启动子PchsA插入pBI12 1的HindIII +Xbal位点构建中间载体pCHB ,再把康乃馨ACC氧化酶基因反向插入中间载体pCHB的XbaI +Sst1位点构建成另一反义植物表达载体pCBO。

引用

页码：775 / 780

页数：6

共 2 条

[1]

Ethylene biosynthetic genes are differentially expressed during carnation （Dianthus caryophyllus L.） flower senescence[J] . Arjen ten Have,Ernst J. Woltering.Plant Molecular Biology . 1997 (1)

[2] ETHYLENE-REGULATED EXPRESSION OF A CARNATION CYSTEINE PROTEINASE DURING FLOWER PETAL SENESCENCE [J].

JONES, ML ;

LARSEN, PB ;

WOODSON, WR .

PLANT MOLECULAR BIOLOGY, 1995, 28 (03) :505-512

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