大鼠谷胱甘肽S-转移酶P1基因顺式调控元件的搜寻

被引：3

作者：

刘东远

全硕

王娟

方福德

机构：

[1] 中国医学科学院,中国协和医科大学

来源：

中国医学科学院学报 | 1998年 / 05期

关键词：

谷胱甘肽S－转移酶基因,顺式调控元件,荧光素酶报告基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q555.8 []; Q71 [生物大分子的结构和功能];

学科分类号：

071010 [生物化学与分子生物学];

摘要：

目的搜寻大鼠谷胱甘肽Ｓ－转移酶Ｐ１基因（ｒａｔｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ－ｔｒａｎｓ－ｆｅｒａｓｅＰ１，ｒＧＳＴＰ１）上游３．０ｋｂ区域内顺式调控元件。方法采用高灵敏度的荧光素酶报告基因载体，以外切酶Ⅲ（ＥｘｏⅢ）、Ｓ１核酸酶对上述３．０ｋｂ片段进行删切后造成缺失，将所获得的一系列缺失质粒分别转染ＨｅＬａ细胞，测定转染细胞裂解液荧光素酶活性。结果当删切从－２．９ｋｂ进展至－２．３ｋｂ时，荧光素酶活性降低６７％（Ｐ＜０．０５），－２．５ｋｂ～－２．２ｋｂ区域能以不依赖于位置、方向性的方式增强基因表达强度，从－１．８ｋｂ缺失到－１．３ｋｂ时，荧光素酶活性升高４倍（Ｐ＜０．０５）。结论ｒＧＳＴＰ１基因上游在－２．５ｋｂ～－２．２ｋｂ及－１．８ｋｂ～－１．３ｋｂ区域内分别存在增强子元件和负调控序列。

引用

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