PCR技术在检测鼠金黄色葡萄球菌中的应用研究

被引:13
作者
高正琴
邢华
李厚达
机构
[1] 扬州大学比较医学中心
关键词
大鼠; 小鼠; 葡萄球菌,金黄色; 聚合酶链反应;
D O I
暂无
中图分类号
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号
摘要
目的 建立实验大小鼠金黄色葡萄球菌的快速检测方法———PCR法。方法 根据已公布的金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因的序列 ,设计并合成一对特异性的引物 ,利用PCR技术扩增nuc基因片段。对金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株抽提的DNA进行扩增。结果 金黄色葡萄球菌PCR产物出现 6 6 8bp的特异性DNA扩增片段 ,而其他非金黄色葡萄球菌未出现扩增片段 ,证实了合成的引物对金黄色葡萄球菌具有特异性。将抽提的金黄色葡萄球菌DNA进行系列稀释 ,测定此PCR体系的敏感性 ,结果显示 ,该PCR体系能检出 3pg金黄色葡萄球菌DNA ,且从抽提DNA到PCR扩增及电泳结束仅需 4h。结论 本研究所建立的扩增耐热核酸酶nuc基因检测鼠金黄色葡萄球菌的PCR方法 ,具有快速、可靠、敏感和特异的特点 ,可用于临床样品和金黄色葡萄球菌感染时的检测 ,适合应用于实验大小鼠的监测。
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共 2 条
  • [1] PCR技术实验指南.[M].(美)C.W.迪芬巴赫(CarlW.Dieffenbach);(美)G.S.德维克斯勒(GabrielaS.Dveksler)著;黄培堂等译;.科学出版社.1998,
  • [2] 精编分子生物学实验指南.[M].(美)F.奥斯伯(FrederickM.Ausubel)等著;颜子颖;王海林译;.科学出版社.1998,