雷帕霉素通过活化MAPK促进神经胶质瘤U87-MG细胞自噬

目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对神经胶质瘤U87-MG细胞自噬的相关作用和机制。方法:用Rapa处理U87-MG细胞,分为正常对照(NC)组(0μmol/L Rapa)及Rapa各浓度组(1、2.5、5、10、20和40μmol/L Rapa),MTT实验检测细胞活性,软琼脂集落形成实验和平板集落形成实验检测细胞集落形成能力,Western blot法检测mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ、beclin-1、p-S6、p70S6K、p-MAPK及GFAP蛋白水平的变化。结果:MTT实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞的活力,并呈现剂量依赖性(P<0.05)。软琼脂和平板集落形成实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞集落形成数(P<0.05)。Western blot结果显示,Rapa处理后mTOR及p-mTOR蛋白水平降低;自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和beclin-1水平显著升高(P<0.05);自噬相关信号通路分子p70S6K表达趋势呈抛物线轨迹,差异无统计学意义(P>0.05);p-S6表达趋势与p70S6K相反,Rapa干预后p-S6表达显著降低,在40μmol/L Rapa干预后上升至NC组的水平;p-MAPK和GFAP水平显著增高(P<0.05)。结论:Rapa通过激活MAPK促进细胞自噬,从而抑制U87-MG细胞增殖。