不同成骨诱导作用下骨髓间充质干细胞的基因表达模式

被引:41
作者
段瑞平
吴凌
林云锋
刘磊
汤炜
田卫东
机构
[1] 四川大学华西口腔医院颌面外科
关键词
骨髓间充质干细胞; 矿化诱导; 骨形成蛋白-2; 基因表达模式;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
目的研究骨髓间充质干细胞不同成骨分化模式的分子调控机制,为将其作为骨组织缺损基因治疗的载体细胞奠定理论基础。方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),传代扩增后分别用矿化培养基(100nmol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠和50mg/mL抗坏血酸)与重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2,500ng/mL)进行诱导,分别于诱导后1、2周行茜素红染色鉴定钙结节形成情况;诱导后1、2和3d时用RT-PCR检测Runx2、Osx、OCN和Col的基因表达情况。结果矿化诱导组和rhBMP-2诱导组,茜素红染色均呈阳性钙结节,但矿化诱导组细胞于1周后形成矿化结节,时间早于rhBMP-2诱导组(2周后形成矿化结节);RT-PCR显示,在矿化诱导组,Runx2在诱导的1、2、3d均没有表达,Osx在诱导后2、3d有表达,OCN和Col在诱导的1、2、3d均有表达;在rhBMP-2诱导组,Runx2和Osx于诱导的第2d开始表达,OCN和Col在诱导的1、2、3d均表达。结论与rhBMP-2相比,矿化培养基通过更为直接的信号传导方式调控着骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,因此矿化培养基诱导骨髓间充质干细胞形成矿化结节的能力强于rhBMP-2。
引用
收藏
页码:856 / 859
页数:4
相关论文
共 6 条
[1]
绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓间充质干细胞的多向分化潜能研究 [J].
李志勇 ;
田卫东 ;
刘磊 ;
陈希哲 ;
林云锋 ;
闫征斌 ;
陈玲 ;
李声伟 .
华西口腔医学杂志, 2005, (02) :152-154
[2]
绿色荧光蛋白基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究 [J].
李志勇 ;
刘磊 ;
田卫东 ;
陈希哲 ;
阎征斌 ;
林云锋 .
中华口腔医学杂志, 2005, (02)
[3]
骨形成蛋白调控成骨分化的信号机制 [J].
王茸影 ;
易静 .
生命科学, 2005, (01) :34-39
[4]
大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及表型和功能特点 [J].
张本斯 ;
王凡 ;
邓力 ;
顿爱社 ;
董立华 ;
李健 ;
羊惠君 .
四川大学学报(医学版), 2003, (04) :738-741
[5]
Use of green fluorescent fusion protein to track activation of the transcription factor osterix during early osteoblast differentiation [J].
Tai, GP ;
Christodoulou, I ;
Bishop, AE ;
Polak, JM .
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 2005, 333 (04) :1116-1122
[6]
Inductive Effects of Dexamethasone on the Gene Expression of Cbfa1; Osterix and Bone Matrix Proteins During Differentiation of Cultured Primary Rat Osteoblasts.[J].Masato Igarashi;Naoko Kamiya;Mitsuharu Hasegawa;Tomohiro Kasuya;Tomihisa Takahashi;Minoru Takagi.The Histochemical Journal.2004, 1